Fosforilācijas modifikācija
Fosforilēto proteīnu un peptīdu pētījumi var palīdzēt cilvēkiem noskaidrot iepriekšminētā procesa mehānismu un vēl vairāk izprast dzīves aktivitāšu būtību. Pēdējos gados, nepārtraukti attīstoties proteomikas tehnoloģijām, proteīnu fosforilācijas pētījumi ir saņēmuši arvien plašāku uzmanību. Daudzi dabiskie toksīni un patogēni arī iedarbojas, mainot intracelulāro proteīnu fosforilācijas statusu.
Fosforilētie polipeptīdi galvenokārt attiecas uz Ser, Tyr un Thr. Atlikuma sānu ķēdes hidroksilgrupa ir pārveidota par skābes fosfāta polipeptīdu. Līdz šim polipeptīdu fosforilēšanas modifikācija galvenokārt ir saistīta ar pēc-fosforilēšanas metodi un divām sintēzes metodēm:
Modificējot ar monomēra metodi, fosforilēto aminoskābi ir grūti kondensēties ar peptīdu ķēdi, jo lielāka sānu ķēdes modifikācijas grupa rada steriskus šķēršļus, un turpmākā aminoskābes ievadīšana būs grūtāka. Īpaši tad, ja tajā ir vairākas fosforilēšanas vietas modifikācijas, sintēze kļūs ārkārtīgi sarežģīta, un galaproduktā ir sarežģīti komponenti, to ir grūti atdalīt un tam ir ārkārtīgi zema raža. Tāpēc, ja peptīdu ķēdē tiek fosforilētas vairākas vietas, var apsvērt pēc-fosforilēšanas metodi. Galvenais sintēzes process ir selektīvi noņemt aminoskābju sānu ķēdes aizsarggrupas, kas jāmarķē pēc polipeptīdu sintēzes pabeigšanas. Tyr, Thr aminoskābes ar neaizsargātām sānu ķēdēm var izmantot tieši reakcijai. Sānu ķēdes aizsarggrupa pie 1% TFA/DCM To var kvantitatīvi noņemt noteiktos apstākļos. Pēc-fosforilēšanas var izmantot bisbenzilfosforamidītu. Tetrazols rada fosforamidīta tetrazola aktīvo starpproduktu, kas ir savienots ar hidroksilgrupu un pēc tam tiek oksidēts peroksiskābes apstākļos, lai izveidotu fosforilgrupu, lai pabeigtu reakciju.
- Mēs sniedzam pSer, pTyr, pThr un D-pSer, D-pTyr, D-pThr fosforilēšanas modifikācijas pakalpojumus.
- Vienlaicīgi var veikt 2 vietu, 3 vietu, 4 vietu un 5 vietu fosforilācijas modifikācijas.
Fosforilēti peptīdi Sintētiskais korpuss (Thr(HPO3), Tyr(HPO3), Ser(HPO3) pagaidiet)
1. Secībā ir 4 fosforilācijas vietas (xxxpSpTxxxpSxxxpTx), tīrība ir 95%, un pabeigšanas cikls ir 3 nedēļas.
